Perkenalan

Di laboratorium biomedis dan kimia modern,tabung kultur sekali pakai banyak digunakan dalam kultur sel, reaksi kimia, pengawetan sampel dan operasi penting lainnya.Pentingnya tabung-tabung tersebut dalam proses eksperimen tidak dapat diabaikan. Karena tabung-tabung kultur ini bersentuhan langsung dengan sampel-sampel eksperimen, bahan, ukuran, penutupnya, dan bahkan sterilisasi atau tidaknya tabung-tabung tersebut akan berdampak signifikan pada hasil-hasil eksperimen. Pemilihan yang tidak tepat dapat menyebabkan kontaminasi silang, kehilangan sampel, atau bias data eksperimen, sehingga memengaruhi akurasi dan reproduktifitas penelitian.

Jenis Utama Tabung Kultur Sekali Pakai

Ada berbagai macam tabung kultur sekali pakai, dan peneliti perlu memilih jenis yang tepat sesuai dengan tujuan percobaan, lingkungan operasi, dan karakteristik sampel. Tabung kultur sekali pakai dikategorikan dalam tiga aspek berikut: bahan, kapasitas, dan fungsi khusus:

1. Klasifikasi berdasarkan bahan

Tabung kultur sekali pakai yang terbuat dari bahan yang berbeda memiliki perbedaan dalam ketahanan suhu, stabilitas kimia, dan sifat optik:

• Polipropilenae: Ketahanan yang baik terhadap suhu tinggi dan korosi kimia, cocok untuk kultur sel rutin, eksperimen biologi molekuler dan aplikasi lainnya.
• Polistirena: transparansi tinggi, mudah untuk mengamati keadaan cairan dan sel, umumnya digunakan dalam pengujian optik, tetapi tidak tahan suhu tinggi, biasanya tidak dapat digunakan untuk autoklaf.
• Tabung kultur kaca:Meskipun dapat digunakan kembali dan stabil secara kimia, harganya mahal, memerlukan prosedur pembersihan dan sterilisasi tambahan, serta menimbulkan risiko kontaminasi silang.

2. Klasifikasi berdasarkan kapasitas

Tergantung pada volume sampel yang diperlukan untuk percobaan, kapasitas tabung kultur berkisar dari volume mikro hingga besar:

• Tabung mikrosentrifus:umumnya digunakan untuk pengeluaran sampel, presipitasi sentrifugal, ekstraksi DNA/RNA dan operasi lainnya.
• Tabung kultur standar: kapasitas yang paling umum digunakan di laboratorium, cocok untuk kultur sel, reaksi pencampuran, pengawetan sampel, dan keperluan lainnya.
• Tabung kultur berkapasitas besar:cocok untuk kultur sel berskala besar atau pemrosesan larutan dalam jumlah besar.

3. Klasifikasi berdasarkan fungsi khusus

Tabung tersedia dengan berbagai fitur tambahan untuk memenuhi kebutuhan eksperimen tertentu:

• Tabung Pra-sterilisasi Aseptik: disterilkan di pabrik dengan radiasi gamma atau autoklaf, cocok untuk eksperimen dengan persyaratan aseptik tinggi.
• Dengan tutup kartrid: memungkinkan pertukaran gas, cocok untuk mikroorganisme atau garis sel yang memerlukan aerasi dan mencegah kontaminasi dari sumber eksogen.
• Tabung Tahan Suhu Rendah: dapat digunakan dengan aman pada suhu -80℃ atau bahkan lingkungan nitrogen cair, cocok untuk pengawetan sampel biologis pada suhu rendah jangka panjang.
• Tabung bertingkat/tidak bertingkat: Tabung pengukur memudahkan untuk estimasi cepat dan pengeluaran volume cairan guna meningkatkan efisiensi percobaan.

Faktor Kunci dalam Memilih Tabung Kultur

Dalam proses perancangan dan pengoperasian eksperimen, pemilihan tabung kultur sekali pakai yang tepat sangat penting untuk memastikan efisiensi eksperimen dan keakuratan hasil. Peneliti harus mempertimbangkan secara komprehensif beberapa faktor utama:

1. Jenis percobaan

Persyaratan untuk tabung kultur sangat bervariasi dari satu percobaan ke percobaan lainnya dan harus dipilih sesuai dengan isi operasi dan lingkungan percobaan:

• Untuk kultur sel: persyaratan sterilitasnya sangat tinggi, dan penggunaan tabung pra-steril dengan tutup kartrid yang dapat bernapas untuk memastikan pertukaran gas direkomendasikan.
• Percobaan PCR/biologi molekuler: harus bebas dari enzim DNA, enzim RNA, dan pipa bebas pirogen, sering kali menggunakan pipa polipropilena bermutu bersih.
• Penyimpanan suhu rendah: Tabung dengan ketahanan suhu rendah yang baik harus digunakan untuk menghindari lisis pada suhu rendah.

2. Karakteristik sampel

Sifat fisikokimia sampel secara langsung mempengaruhi pilihan material dan konfigurasi fungsional tabung kultur:

• Sampel cair atau padat: menentukan volume yang dibutuhkan dan bentuk lubang tabung.
• Sampel asam atau basa: sampel yang sangat korosif memerlukan bahan yang tahan kimia untuk menghindari deformasi atau kontaminasi tabung.
• Apakah harus menghindari cahaya?:sampel yang peka cahaya harus memilih tabung kultur bahan kuning atau buram, untuk mencegah fotodegradasi.

3. Persyaratan sterilisasi

Kebutuhan sterilisasi dan jenis sterilisasi yang digunakan merupakan pertimbangan utama dalam pemilihan tabung:

• Pra-sterilisasi vs. sterilisasi mandiri: produk pra-sterilisasi pabrik cocok untuk eksperimen berkapasitas tinggi, menghemat waktu; jika laboratorium memiliki peralatan sterilisasi autoklaf, Anda dapat memilih tabung PP yang dapat diautoklaf.
• Kompatibilitas sterilisasi: Misalnya, bahan PS tidak cocok untuk autoklaf dan hanya untuk sekali pakai.

4. Kompatibilitas

Tabung harus disesuaikan dengan peralatan laboratorium untuk memastikan pengoperasian yang lancar dan hasil yang dapat diandalkan:

• Kompatibilitas sentrifugal: Tabung yang digunakan untuk sentrifugasi harus memiliki struktur yang kuat untuk menahan gaya sentrifugal pada kecepatan putaran tinggi.
• Kompatibilitas otomatisasi:Untuk percobaan yang memerlukan penggunaan robot pipet, sistem pengeluaran otomatis, dll., ukuran tabung standar harus digunakan.

5. Biaya dan keberlanjutan

Pengendalian biaya dan konsumsi sumber daya yang wajar juga merupakan pertimbangan penting dalam memenuhi kebutuhan eksperimental:

• Sekali pakai vs. dapat digunakan kembali: tabung sekali pakai mudah dikelola dan menghindari kontaminasi, cocok untuk eksperimen berkapasitas tinggi; tabung kaca yang dapat digunakan kembali cocok untuk eksperimen dasar dengan anggaran terbatas.
• Skala pembelian: pembelian volume besar dapat mengurangi harga satuan, cocok untuk proyek jangka panjang dan skala besar; spesifikasi khusus skala kecil lebih fleksibel tetapi biayanya relatif tinggi.

Rekomendasi untuk Skenario Aplikasi Umum

Sesuai dengan kebutuhan spesifik berbagai jenis percobaan, tabung kultur sekali pakai berikut direkomendasikan untuk beberapa skenario aplikasi umum, yang bertujuan untuk meningkatkan efisiensi dan keandalan percobaan:

1. Budidaya Sel

• Tipe yang direkomendasikan: tabung kultur polipropilena steril dengan tutup kartrid yang dapat bernapas
• Alasan: Bahan polipropilena memiliki kelembaman kimia dan biokompatibilitas yang baik, cocok untuk cairan kultur sel. Penutup kartrid dapat mewujudkan pertukaran gas yang efektif, mencegah kontaminasi mikroba, dan memenuhi lingkungan gas yang dibutuhkan untuk proliferasi sel.

2. Realisasi molekuler PCR/qPCR

• Jenis yang direkomendasikan: tabung PCR khusus bebas nuklease, bebas pirogen atau tabung mikrocentrifuge
• Alasan: Tabung polipropilena dengan kemurnian tinggi, setelah perawatan yang ketat, dapat secara efektif menghindari degradasi atau kontaminasi sampel, untuk memastikan hasil amplifikasi yang akurat dan andal. Desain dinding tipis direkomendasikan untuk meningkatkan efisiensi perpindahan panas.

3. Penyimpanan suhu rendah

• Tipe yang Direkomendasikan: Tabung Polypropylene Tahan Suhu Rendah dengan Desain Retak Anti-Beku dan Tutup Segel Sekrup
• Alasan: Tabung ini dapat digunakan untuk menyimpan sampel dalam jangka waktu lama pada suhu -80°C atau bahkan dalam nitrogen cair, dan struktur khususnya mencegah tabung dari retak getas dan kebocoran sampel. Cocok untuk penyimpanan jangka panjang sel, sampel darah, protein atau asam nukleat.

4. Sentrifus

• Jenis yang direkomendasikan: tabung polipropilena toleransi tinggi, desain dasar bulat atau kerucut, dengan rotor sentrifus
• Alasan: Tabung PP memiliki ketahanan sentrifugal yang baik dan dapat menahan gaya sentrifugal yang tinggi tanpa deformasi atau pecah. Bagian bawah yang berbentuk kerucut membantu mengumpulkan sel atau endapan di bagian tengah dan meningkatkan laju pemulihan.

Kesalahan Umum dan Cara Menghindarinya

Dalam praktiknya, kegagalan percobaan akibat pemilihan tabung kultur yang tidak tepat terjadi dari waktu ke waktu. Beberapa kesalahan umum dan saran solusi yang sesuai tercantum di bawah ini untuk referensi peneliti:

1. Penyalahgunaan bahan yang tidak tahan suhu tinggi untuk autoklaf